Тема: Техника работы в ламинар боксе

  • Вид работы: Реферат
  • Предмет: Культура клеток и тканей
  • Формат файла: MS Word

скачать реферат

 

 

Содержание

Введение

  1. Ламинарные боксы
  2. Использование ламинарных боксов
  3. Отличительные особенности конструкции ламинарного укрытия (бокса
  4. Особенности работы с боксом
  5. Дезинфекция и уборка бокса

Заключение

Литература

 

Введение

Обычно лаборатория биотехнологии состоит минимум из 3-х помещений. Это бокс, где ведутся стерильные работы; комната для приготовления питательных сред, хранения химикатов, оборудования и прочих вспомогательных мелочей; автоклавная. Вынесение автоклавов в отдельную комнату продиктовано требованиями безопасности, поскольку процесс стерилизации идет под давлением и в случае неисправности прибора могут случиться жертвы и разрушения. 
Впрочем, технический прогресс не стоит на месте и современные модели автоклавов более надежны и безопасны, с ними могут работать и необученные специально люди, а отдельных комнат не требуется.
Стерильные работы можно проводить в специальном помещении - микробиологическом боксе или же использовать ламинар-боксы. В любом случае полы и стены комнаты, где ведутся стерильные работы, должны быть моющимися (в идеале - кафельные) и не содержать материалы -"пылесборники". 
Помещение, где ведутся работы с культурами тканей необходимо периодически стерилизовать ультрафиолетовыми лампами (кварцевать), поэтому наличие любой растительности там исключено. 
Для работы с культурами животных клеток требования к стерильности должны быть более жесткими по сравнению растительными культурами, поскольку вероятность контаминации выше. 
Не рекомендуется в одних и тех же боксах вести работы с микробиологическими объектами и культурами клеток. Микроорганизмы более устойчивы к внешним факторам, и простерилизовать после работы с ними помещение гораздо труднее, особенно это касается работ с грибами. 
Все изложенное выше касается работ с непатогенным материалом. Уровни защиты при работе с патогенным материалом иные, и они требуют большей безопасности. 

Выращивание изолированных клеток, тканей, органов, растений-регенерантов, водных культур и грибов, используемых в биотехнологии, проводят в условиях полной асептики, т.е. стерильно. Особое внимание следует обратить на чистоту посуды, предназначенной для приготовления питательных сред и их компонентов; на подготовку объектов к пересадке, пассированию и культивированию. Только некоторые объекты (хлорелла, азолла) можно выращивать в нестерильных условиях.

1. Ламинарные боксы

Ламинарные боксы используются в лабораториях для обеспечения высокой степени защиты исследуемых образцов. Стерильная рабочая среда создается за счет проходящего воздуха через специальную систему фильтрации и поступающего через рабочую поверхность в ламинарном или однонаправленном воздушном потоке.

Существуют модели с вертикальным и горизонтальным воздушным потоком. В вертикальных моделях фильтрованный воздух поступает сверху,при этом уменьшается процент возникновения зон турбулентности - это лучший вариант, когда большие объекты, такие как микроскоп, помещены в кабину.

Для работы с мелкими объектами лучше подойдет модель, у которого поток направлен горизонтально, т.к. вертикальный поток может сдуть частицы с рук или рукавов прямо на исследуемые образцы, в то время как горизонтальный поток направлен в сторону лаборанта.

Для правильного выбора необходимо понимать различие между ламинарными боксами и боксами биологической безопасности.

Первый вариант не защищает лаборанта и окружающую среду от опасных материалов и частиц, а только лишь помещаемые исследуемые образцы от внешнего и перекрестного загрязнений.

Для предотвращения попадания микроорганизмов и опасных веществ в окружающую среду используются специальные модели биологической безопасности. Существует несколько классов (1,2,3), которые предоставляют различные уровни защиты от взрывоопасных или инфекционных материалов. Во всех классах установлены специальные HEPA-фильтры.

1 класс обеспечивает безопасность оператора и окружающей среды при работе с опасными материалами и образцами, а также для предотвращения их перекрестной контаминации внутри рабочей камеры.

Класс 2 биологической безопасности разделены на 4 подтипа (A1, A2, B1 и B2) и имеют дополнительную функцию защиты образцов, поскольку воздух подается через HEPA-фильтры перед попаданием в рабочее пространство. Подтипы класса 2 отличаются в различном количестве рециркуляционного воздуха внутри рабочего пространства.

3 класс (также известные как перчаточные боксы) обеспечивают максимальную защиту для работы в лабораториях сдерживания уровня 4 биологической безопасности. Имеется герметично запечатанный перчаточный бокс с доступом через резервуар Данка или коробку двупольной двери, которая позволяет производить дезинфекцию.

 2. Использование ламинарных боксов

Ламинарные боксы используются при микробиологических, молекулярно-биологических работах, работах с культурой клеток, тканей и органов.

Если это определено национальными регламентами, боксы биологической безопасности используют для любых видов работы с патогенными микроорганизмами и контаминированными порошками.

Необходимо использовать боксы биологической безопасности, которые предназначены для применения в лаборатории в соответствии с существующей окружающей средой.

Для правильного выбора оборудования при оснащении лабораторий и других производственных объектов необходимо четко понимать различие между Ламинарными боксами (укрытиями) и Ламинарными боксами биологической безопасности.

Ламинарные боксы (укрытия) являются основным оборудованием, используемым для создания беспылевой абактериальной воздушной среды. Ламинарные боксы обеспечивают защиту исключительно продуктов, помещенных в рабочую зону, от внешнего и перекрестного загрязнений, и не обеспечивают защиту ни персонала, ни окружающей среды.

Ламинарные боксы биологической безопасности  используются для физической изоляции (удержания и контролируемого удаления из рабочей зоны) микроорганизмов с целью предотвращения возможности заражения персонала и контаминации воздуха рабочей зоны и окружающей среды. 
Согласно европейскому стандарту EN 12469:2000 различают три класса боксов биологической безопасности.

Выбор ламинарного бокса (укрытия) зависит только от требований к чистоте воздушной среды в рабочей зоне бокса, в то время как выбор Бокса биологической безопасности основывается на следующих факторах:

степень риска, сопутствующая работе с используемым в эксперименте агентом;

возможность образования аэрозолей при применении конкретной лабораторной методики;

необходимость предохранения эксперимента от воздушной контаминации

 3. Отличительные особенности конструкции ламинарного укрытия (бокса)

Механизм подъема фронтального стекла позволяет фиксировать его в двух положениях, что облегчает обработку дезрастворами рабочей камеры, не имеющей крепежных элементов и выступов, а также самого стекла с обеих сторон.

Наклон передней панели улучшает обзор рабочей камеры и увеличивает полезную площадь столешницы.

Все системы электроуправления расположены за пределами основного корпуса бокса для легкости доступа.

Время УФ-обработки рабочей камеры бокса устанавливается с помощью таймера, отображающего также и время общей наработки лампы блока УФО.

Корпус окрашен порошковой эмалью, стойкой к обработке дезрастворами.

Рабочая столешница выполнена из нержавеющей стали.

На подставке предусмотрены винтовые опоры для фиксации и регулировки положения бокса и колесные опоры, предназначенные исключительно для удобства перемещения при установке на место эксплуатации.

Микропроцессорная система управления двигателем вентилятора без применения энергопреобразующих силовых элементов - SintelL-1.Система позволяет максимально снизить уровень электропотребления работающего бокса, уменьшить уровень акустических шумов и помех.

Система статической стабилизации воздуха AIS LS обеспечивает постоянный воздушный баланс внутри рабочей камеры ламинарного бокса вне зависимости от степени загрязненности фильтра.

Блок освещения вынесен за пределы рабочей камеры и не вызывает турбулентности потока воздуха.

Панель управления с ЖК-дисплеем индицирует включение систем изделия, их возможные неисправности, выбранные режимы работы и технологический таймер.

Электронная панель управления обеспечивает легкость эксплуатации и дезобработки.

 4. Особенности работы с боксом

 Начало работы в ламинарном боксе включает пункты:

  • чтобы защитить руки,необходимо надеть перчатки
  • необходимо разместить в ламинарном шкафу нужные предметы для работы 
  • дезинфекция поверхности рабочей зоны и стенок внутри ламинарного бокса
  • включаем ламинарный бокс и ждем в течение некоторого времени
  • не стоит перенасыщать рабочую камеру ламинарного бокса объектами исследования
  • перед началом работы надо закрыть отверстие для слива ламинарного шкафа

Работа в ламинарном боксе включает пункты:

  • не надо закрывать передние и задние решетки воздушного забора ламинарного бокса
  • необходимо работать в ламинарном боксе,находясь как можно дальше от рабочей камеры
  • во время работы в ламинарном боксе движения рук должны быть медленными
  • необходимо дезинфицировать поверхность ламинарного бокса.
  • исключайте влияние всех посторонних потоков воздуха (сквозняки например)
  • размещайте пакеты для биологических отходов внутри рабочей камеры, а не снаружи ламинарного шкафа (бокса).

Перед работой в боксе необходимо продезинфицировать поверхности с помощью дезсредства и включить бактерицидные лампы минимум на 30 минут.

Во время работы бактерицидные лампы должны быть выключены.

Во время действия бактерицидных ламп в боксе не должны находиться: чашки петри, пробирки и иные емкости содержащие питательные среды, культуры микроорганизмов, пробы продуктов для анализа и т.д. В боксе может находится только чистая посуда для предстоящей работы и постоянно используемые инструменты (спиртовка, пинцет, бактериальные иглы и т.д.).

В боксах биологической безопасности не допускается использовать газовые горелки или установки для сжигания отходов. Допустимо использовать газовую горелку с маленьким пламенем таким образом, чтобы не нарушался поток воздуха. Также в боксе применяют одноразовое оборудование(бактериологические петли, пипетки и т. д.).

В боксах биологической безопасности не допускается наличие оборудования, которое не применяется в работе.

Все необходимое размещают до начала работы внутри бокса, чтобы свести к минимуму количество движений рук внутри и вне рабочей зоны. Расположение оборудования и материалов должно быть таким, чтобы свести к минимуму нарушение потока воздуха в рабочей зоне.

Операторы должны быть обучены правильному использованию боксов, чтобы обеспечивать как их безопасность, так и сохранность образца или культуры микроорганизмов.

 5. Дезинфекция и уборка бокса

Рабочую зону очищают и обеззараживают после использования подходящим дезсредством (раствор и метод очищения по инструкции производителя), которое не обладает коррозийными свойствами.

Регулярно обследуют защитные предфильтры проволочных сеток и вытирают их чистой, пропитанной дезинфицирующим средством тканью.

Для ламинарных шкафов с очисткой воздуха наружную часть фильтра необходимо регулярно очищать под вакуумом таким образом, чтобы не повредить фильтрующую среду.

Боксы биологической безопасности должны окуриваться перед заменой фильтра или плановым обслуживанием.

После очистки бокса для обеззараживания можно использовать ультрафиолетовые (УФ) лампы. УФ лампы регулярно очищают или заменяют в соответствии с инструкциями изготовителя.

Проверка ламинарного бокса

Квалифицированный оператор должен проверять эффективность бокса биологической безопасности при получении и затем с регулярными интервалами, как рекомендует изготовитель, а также после любого ремонта или модификации.

Следует периодически выполнять проверку чистоты рабочей поверхности и стен бокса от любого микробного загрязнения.

Необходимо периодически осуществлять проверку числа микроорганизмов, циркулирующих в воздухе во время работы фильтров, с помощью обычного борудования. Например, экспонируя несколько открытых чашек Петри, содержащих неселективную агаровую культуральную среду (например PCA), в каждом кабинете в течение 30 мин. Допускается использовать другие методы.

Заключение

Бокс биологической безопасности (ламинар) применяется для оснащения рабочих мест в медицинских, фармацевтических и других учреждениях, работающих с патогенными агентами, требующих особой воздушной среды (вирусологические и бактериологические лаборатории, работающие с микроорганизмами, при производстве стерильных лекарственных средств и др.).

Для правильного выбора оборудования при оснащении лабораторий и других производственных объектов необходимо четко осознавать различие между ламинарными боксами и боксами биологической безопасности.

Ламинарные боксы являются основным оборудованием, используемым для создания беспылевой абактериальной воздушной среды. Ламинарные боксы обеспечивают защиту исключительно продуктов, помещенных в рабочую зону, от внешнего и перекрестного загрязнения, и не обеспечивают защиту ни персонала, ни окружающей среды.

Боксы биологической безопасности используются для физической изоляции (удержания и контролируемого удаления из рабочей зоны) микроорганизмов с целью предотвращения возможности заражения персонала и контаминации воздуха рабочей зоны и окружающей среды.

Выбор ламинарного бокса зависит только от требований к чистоте воздушной среды в рабочей зоне бокса, в то время как выбор бокса биологической безопасности основывается на следующих факторах: степень риска, сопутствующая работе с используемым в эксперименте агентом возможность образования аэрозолей при применении конкретной лабораторной методики необходимость предохранения эксперимента от воздушной контаминации

 Литература

  1. practice.biotechnolog.ru›laminar.htm
  2. http://www.lamsys.ru/boks.php
  3. http://www.labmeb.ru/laminar.php
  4. http://www.gostedu.ru/52180.html

Электронный адрес для связи admin@vseobiology.ru

© 2015-2017 https://vseobiology.ru | При использовании материалов сайта - прямая ссылка на vseobiology.ru обязательна.

Заказать курсовую

^ Наверх