В связи с успехами генетики и генетической инженерии появились возможности целенаправленного конструирования вакцинных штаммов. Получены рекомбинантные штаммы вируса гриппа, а также штаммы вируса вакцины со встроенными генами протективных антигенов вируса гепатита В. Вирусы получают соответственно из культур бактерий и вирусов, выращенных на тех же средах накопления, что и в случаях получения живых вакцин, и затем подвергнутых инактивации:

  • нагреванием (гретые вакцины),
  • формалином (формолвакцины),
  • ультрафиолетовым излучением (УФ-вакцины),
  • ионизирующим излучением (радиовакцины),
  • спиртом (спиртовые вакцины).

Инактивированные вирусы ввиду недостаточно высокой иммуногенности и повышенной реактогенности не нашли широкого применения.

Производство молекулярных вирусов– более сложный технологический процесс, т. к. требует:

  • извлечения из выращенной микробной массы протективных антигенов или антигенных комплексов,
  • очистки и концентрирования антигенов,
  • введения в препараты адъювантов.

Выделение и очистка антигенов с помощью традиционных методов:

  • экстракции трихлоруксусной кислотой,
  • кислотного или щелочного гидролиза,
  • ферментативного гидролиза,
  • высаливания нейтральными солями,
  • осаждения спиртом или ацетоном

сочетаются с применением современных методов:

  • скоростного ультрацентрифугирования,
  • мембранной ультрафильтрации,
  • хроматографического разделения,
  • аффинной хроматографии, в т.ч. на моноклональных антителах.

С помощью этих приемов удается получать антигены высокой степени очистки и концентрирования. К очищенным антигенам, стандартизированным по числу антигенных единиц, с целью повышения иммуногенности добавляют адъюванты, чаще всего сорбенты-гели (гидрат окиси алюминия и др.). Препараты, в которых антиген находится в сорбированном состоянии, называют сорбированными или адсорбированными (дифтерийный, столбнячный, ботулинический сорбированные анатоксины). Сорбент играет роль носителя и адъюванта. В качестве носителя в синтетических вакцинах предложены всевозможные полимеры.

Интенсивно разрабатывается генно-инженерный способ получения протективных белковых антигенов бактерий и вирусов. В качестве продуцентов используют обычно эшерихии, дрожжи, псевдомонады со встроенными в них генами протективных антигенов. Получены рекомбинантные штаммы бактерий, продуцирующие антигены возбудителей гриппа, коклюша, кори, герпеса, гепатита В, бешенства, ящура, ВИЧ-инфекции и др.

Получение протективных антигенов генно-инженерным способом целесообразно в том случае, когда выращивание микробов связано с большими трудностями или опасностями, или когда трудно извлекать антиген из микробной клетки.

Принцип и технология получения вируса на основе генно-инженерного способа сводятся к:

  • выращиванию рекомбинантного штамма,
  • выделению и очистке протективного антигена,
  • конструированию конечного препарата.

Препараты вируса, предназначенные для иммунизации людей, проверяют на:

  • безвредность,
  • реактогенность,
  • иммуногенность.

Безвредность включает проверку на лабораторных животных и других биологических системах

© 2015-2019 vseobiology.ru | При использовании материалов сайта - прямая ссылка на vseobiology.ru обязательна.

Заказать курсовую скидка 15%

^ Наверх