Для оценки общего иммунного статуса используют наиболее простые и достоверные показатели, отражающие суммарную эффективность работы всех систем иммунитета, для изучения уязвимого звена - специфичные для каждой системы дифференциальные тесты. Следовательно, изучение иммунного статуса проводится не менее чем в два этапа. Р.П. Петров с соавторами в 1984г. создали двухэтапный подход к оценке иммунного статуса, в соответствии с которым лабораторные иммунологические тесты разделены на тесты первого и второго уровня.
На первом этапе изучения иммунного статуса с помощью простых ориентировочных методов выявляют “грубые” дефекты фагоцитоза, клеточного и гуморального иммунитета.
К тестам первого уровня относят:
- определение абсолютного и относительного содержания лимфоцитов в периферической крови;
- определение количества Т - и В - лимфоцитов;
- определение уровня иммуноглобулинов основных классов (IgG, IgM, IgA);
- определение фагоцитарной активности лейкоцитов;
- определение титра комплемента (не обязательно).
С учетом анализа результатов теста первого уровня определяют дальнейшую тактику иммунологического исследования.
Более тщательный и глубокий анализ состояния иммунной системы проводят с помощью тестов второго уровня - аналитических методов. К ним можно отнести методы оценки функциональной активности:
- Т - и В - лимфоцитов,
- фагоцитов,
- вспомогательных клеток,
- естественных киллеров,
- компонентов системы комплемента и многих других.
Методы исследования главных компонентов иммунной системы принято делить также на:
- скрининговые,
- развернутые.
При оценке В - системы иммунитета к скрининговым тестам относятся: определение количества CD19+ и CD20+ клеток, IgG, IgM и IgA, а также IgG1,2,3,4, к развернутым - бласттрансформацию на митоген лаконоса и S.aureus, поверхностных маркеров В - лимфоцитов.
При оценке Т - системы иммунитета к скрининговым методам можно отнести:
- кожные тесты на бактериальные антигены,
- определение поверхностных маркеров Т - лимфоцитов CD3, CD4, CD8,
- бласттрансформацию на фитогемагглютинин.
К развернутым:
- изучение продукции цитокинов,
- активационных маркеров,
- Т - клеточных рецепторов.
При оценке фагоцитоза к скрининговым тестам относят:
- определение количества нейтрофилов,
- изучение их морфологии и образования активных форм кислорода,
к развернутым – определение :
- киллинга микробов,
- лизосомальных ферментов,
- цитокинов.
Существующие методы оценки иммунного статуса постоянно совершенствуются, однако есть ряд общих правил, которых необходимо придерживаться при оценке иммунограмм:
- комплексный анализ, а не оценка одного показателя;
- анализ в комплексе с клиническими и анамнестическими данными;
- оценка резких сдвигов показателей (не менее 20% от нормы);
- анализ в динамике;
- анализ не только (и не столько) абсолютных данных, а соотношений показателей (особо - индекс Th/Ts);
- учет возможных индивидуальных особенностей (возраст, сопутствующие заболевания) и колебаний показателей (физиологических и патологических - прием пищи, физические нагрузки, время суток, действие стрессоров и т.д.);
- учет региональных норм;
учет материально - технической базы лаборатории. На вооружении современной лаборатории - проточные цитометры и другое оборудование, которое позволяет наиболее точно и подробно определить иммунный статус (лазерная проточная цитофлюориметрия).