Vinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.x

Культивирование растений

Для получения культивируемых каллусных клеток фрагменты тканей (первичные экспланты) помещают на искусственную питательную среду в пробирки, колбы или чашки Петри. Это требует полной асептики, так как грибная или бактериальная инфекция ингибируют рост клеток и приводят культуру к гибели. Поэтому эксплант поверхностно стерилизуют (от 1 до 30 мин в зависимости от его типа) растворами, содержащими активный хлор или ртуть (гинохлорит кальция или натрия, сулема, диацид), к которым добавляют детергенты (для лучшего смачивания поверхности экспланта). Стерилизацию можно разделить на три этапа:

  1. предварительная стерилизация исходного растительного материала. Условия обработки варьируют в зависимости от объекта. Хранящиеся органы промывают водопроводной водой, фрагменты стебля, корня или листа также промывают проточной водопроводной водой и помещают в спирт. Предварительная стерилизация семян – более длительная процедура, зависящая от степени их загрязнённости.
  2. собственно стерилизация. Предварительно простерилизованные ткани и органы помещают в стерилизующий раствор. Необходимое условие процесса стерилизации – это обеспечение достаточной степени чистоты объекта, и сохранность его жизнеспособности.
  3. Постстерилизация. Отмывание объекта от стерилизующего раствора порциями дистиллята.

После инкубации в стерилизующем растворе экспланты промывают тремя порциями стерильной воды по 10 мин в каждой. Питательную среду стерилизуют в автоклаве при 70 - 80 кПа в течение 15—30 мин (в зависимости от объема среды) или фильтруют через ультрафильтры. Посуду, инструменты и материалы, необходимые для работы, также стерилизуют в автоклаве в течение 1 ч при 200 кПа, или сухим жаром в стерилизационных шкафах (при 160°С 2 ч или 1 ч при 180 °С). Работу с культурами проводят в боксах микробиологического типа, облучаемых перед работой ультрафиолетом, или в ламинар-боксах, где асептика достигается постоянной подачей стерильного воздуха в рабочий объем камеры.

© 2015-2019 vseobiology.ru | При использовании материалов сайта - прямая ссылка на vseobiology.ru обязательна.

Электронный адрес для связи artemchichkov@gmail.com

^ Наверх