Кроме состава питательной среды, при получении клеточной культуры и ее выращивании большое значение имеют физико-химические факторы.
Все факторы, влияющие на рост и развитие растений условно можно разделить на:
- физические,
- химические,
- гормональные.
К физическим факторам относятся температура, свет, кислотность среды и др. От температуры как фактора, координирующего работу ферментов, зависит скорость метаболических процессов, а также транспирации, влияющих на поглощение. При низких температурах транспортные белки в мембране работают медленнее. А при высоких, вследствие повышения проницаемости мембран, пассивно выделяются ионы из клетки. Генетически и эпигенетически разные культуры неодинаково относятся к температуре. Суспензия клеток женьшеня прекращает рост при температуре 27 °С, а диоскореи дельтовидной растет при 32 °С. Поэтому обычно используют температуру 26±1°С.
Свет – один из важнейших факторов роста и развития растений, так как он выполняет две функции: субстратную и регуляторную. В темноте поглощение солей замедляется и постепенно прекращается, плохо развиваются корни. На свету же усиливается транспирационный ток. С увеличением температуры увеличивается и величина минимальной интенсивности света. Клеточные культуры выращивают либо в темноте, либо под лампами белого света. Там, где комбинация этих факторов наиболее благоприятна, резко увеличивается рост.
На клональное микроразмножение и рост растений также влияет и кислотность среды, определяющая доступность для растений питательных веществ. Известно, что сильнокислые или щелочные среды лимитируют поступление некоторых элементов, например, фосфора и железа, делая их относительно нерастворимыми и этим ограничивая рост растений. В то же время при высокой кислотности большое количество этих элементов переходит в растворенное состояние и становится токсичным для эксплантов. Так, при несоблюдении оптимального pH среды на некоторых эксплантах каллус вообще не образуется. Обычно pH среды после автоклавирования остается на уровне 4,5-5,0, тогда как однодольные растения (злаки) в культуре растут при pH около 6,0.
Необходимо также учитывать фотопериод, состав газов, действие электрического тока и другие условия.