Ламинар-боксы предназначены для выполнения различных работ с культурой изолированных клеток и тканей, требующих стерильности. Стерильность обеспечивается с помощью бактериальных фильтров, установленных в ламинар-боксе, через которые нагнетается воздух. За 40 минут до начала работы ламинар-бокс облучают бактерицидными ультрафиолетовыми лампами (20-30 минут). Предварительно в ламинар-боксе размещают:
- спиртовую или газовую горелки,
- спички,
- фарфоровый стакан с 96%-м спиртом и стерильной водой.
Работы в ламинар-боксе проводят следующем образом:
- Внутреннюю поверхность ламинар-бокса, спиртовку, пробирки с питательной средой протирают 70%-м спиртом.
- После включения ультрафиолета включают вытяжку и после проветривания помещения в течение 15-20 минут приступают к работе.
- Помещают в ламинар-бокс сосуды с растительным материалом.
- Поверхность сосудов и руки тщательно протирают 70%-м спиртом. При работе со стерильной посудой и материалом необходимо помнить, что нельзя проносить руки над открытой стерильной поверхностью.
- Зажигают спиртовку, обращая особое внимание на то, чтобы она горела ровным сильным пламенем.
- Все инструменты перед использованием и в процессе работы стерилизуют, для чего помещают в сосуд с 96%-м спиртом и обжигают внесением в пламя спиртовки до полного выгорания спирта (необходимо видеть пламя горящего спирта!). Если пламя на инструментах не видно, необходимо выключить свет в ламинар-боксе и повторить процедуру обжигания. Не разрешается вносить инструменты после обжигания в пламени спиртовки и вновь в сосуд со спиртом без их остывания в течение 10-15 секунд (в целях избегания воспламенения спирта в сосуде). В случае воспламенения сосуда со спиртом необходимо сразу накрыть сосуд плотным полотенцем и прижать его на несколько секунд, перекрывая доступ воздуху к горящей поверхности.
- Колбы и другие сосуды, закрытые крышками из фольги, открывают и обжигают горлышко в пламени спиртовки; такая же процедура повторяется после каждого разлива среды или воды для выжигания капель, остающихся на горлышке.
- После посадки экспланта в колбу на среду достают пинцет из сосуда со спиртом, обжигают его, горло сосуда и крышку из фольги с двух сторон, и закрывают колбу. Через некоторое время после охлаждения фольги ее плотно прижимают.
- При работе с биологическими пробирками после посадки эксплантов горлышко прожигается и над пламенем спиртовки закрывается ватномарлевой пробкой.
- В случае использования чашек Петри по окончании работы плотно заклеивают лейкопластырем или другой клейкой лентой щель между двумя половинками.
- По окончании работы колбы, пробирки и чашки Петри подписывают и помещают в условия культивирования. Поверхность ламинар-бокса протирают 70%-м спиртом, инструменты и материалы упаковывают и помещают на стерилизацию.