Если мой сайт помог вам в подготовке к экзаменам вы можете отправить ссылку своим друзьям биологам.  Это сделает ресурс лучше!

Vinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.x

В настоящее время существуют два способа культивирования протопластов:

  1. метод жидких капель,
  2. метод платирования.

В первом методе суспензию протопластов в виде капель помещают на пластиковые чашки Петри. При этом обеспечиваются:

  • хороший обмен газами через воздушную фазу,
  • удаление в раствор (диффузия) экскретируемых продуктов,
  • легкость добавления свежего питательного раствора.

Недостатки метода:

  1. изолированные протопласты агрегируются в центре капли, в результате образуя большое количество токсинов;
  2. нельзя получить индивидуальную колонию протопластов.

Вариацией этого способа является культивирование единичных изолированных протопластов в микрокаплях объемом 1 мкл, предложенное Ю. Глебой в 1978 г.

Во втором методе- суспензию протопластов наливают в пластиковые чашки Петри, добавляют равный объем той же среды с 1% агаром при температуре не выше 45оС. После остывания чашки Петри переворачивают и культивируют при 28оС. В данном случае протопласты фиксированы в одном положении и физически отделены друг от друга. Это дает возможность наблюдать за развитием интактного протопласта:

  • формированием клеточной стенки,
  • делением, ростом,
  • развитием растения.

Вариантом этой техники является использование кормящих протопластов или клеток, подвергнутых воздействию рентгеновского или γ-излучения, что блокирует их способность к делению. Такие протопласты или клетки смешивают с жизнеспособными протопластами, и они поддерживают и стимулируют их рост.

Сразу после удаления раствора фермента начинается образование клеточной стенки. Труднее добиться деления клеток и регенерации растений. Регенерация растений осуществляется либо через эмбриогенез, либо через развитие каллуса с дальнейшей индукцией морфогенеза. Добиваются этого добавлением в среду ауксинов или сочетания ауксинов с цитокининами.

На пролиферацию клеток, возникших из протопластов, влияет 4 фактора:

  1. видовая специфичность и физиологическое состояние исходной ткани растения,
  2. способ и условия выделения протопластов,
  3. плотность высева протопластов,
  4. состав питательной среды.

Положительные стороны метода платирования:

  • на одном протопласте можно наблюдать последовательность его развития, в том числе формирование клеточной стенки, деление клеток и т. д.,
  • нет агрегации изолированных протопласт и накопления токсинов.

Недостатки метода: возможно повреждение протопластов при смешении с теплым агаром.

Вариант метода платирования - использование «кормящего слоя» или ткани-«няньки». Часто применяют метод совместных культур, когда объединяют изолированные протопласты с быстрым ростом и протопласты с трудным культивированием. При этом вещества, выделяемые быстрорастущими протопластами, активируют рост другой партии.

Давайте вместе сделаем данный сайт лучше! Поделитесь ссылкой на этот сайт со своими одногрупниками. Это поможет развитию нашего сайта.

2015-2021 © Биология для студентов | При использовании материалов сайта - прямая ссылка на vseobiology.ru обязательна.

^ Наверх