Если мой сайт помог вам в подготовке к экзаменам вы можете отправить ссылку своим друзьям биологам.  Это сделает ресурс лучше!

Vinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.xVinaora Nivo Slider 3.x

Весь процесс можно разделить на 4 этапа:

  1. Выбор растения –донора, изолирование и стерилизация экспланта, создание условий для его роста на питательной среде in vitro.
  2. Собственно микроразмножение, т.е. увеличение числа инициалей на экспланте и образование из них побегов с помощью:
  • стимуляции развития всех пазушных почек экспланта вследствие подавления апикального доминирования;
  • микрочеренкования побега, сохраняющего апикальное доминирование;
  • индукции образования адвентивных почек тканями листа, стебля, чешуйками и донцем луковиц, корневищем, зачатками соцветий (без образования каллусной ткани);
  • получения каллусной ткани с последующей индукцией органогенеза или соматического эмбриогенеза.
  1. Укоренение размноженных растений и их адаптация к условиям in vivo.
  2. Выращивание растений (извлеченных из культуральных сосудов) в почве или искусственном субстрате (в условиях теплицы). Подготовка к реализации или высадке в поле. Верхушка побега проростка с гипокотилем

На 1 и 2 этапах КМР варьируют состав и сочетание регуляторов роста в питательной срсде. Проблемой здесь является ингибирование роста токсическими веществами, выделяемыми эксплантами в среду. Например, в результате травмы экспланта при его изолировании активируются фенолазы - ферменты, окисляющие фенолы; продукты окисления фенолов обычно ингибируют деление и рост клеток экспланта. Для снятия подобных эффектов эксплант иногда отмывают в течение 4 24 ч дистиллированной водой или аскорбиновой кислотой (1 мг/л). Также в питательную среду рекомендуется добавлять антиоксиданты (аскорбиновую кислоту - 1 мг/л; глутатион - 4-8 мг/л; дитиотрейтол -3 мг/л; диэтилдитиокарбамат - 2-5 мг/л; поливинилпирролидон - 5000-10000 мг/л). Рекомендуется первые 4-5 дней держать культуры в темноте и только затем переносить на свет (освещенность 1—2 клк).

На 2 этапе должно быть быстрое размножение экспланта, а также трансплантов при длительном субкультивировании. Для этого подбирают оптимальные концентрации фитогормонов, причем каждый новый объект требует корректировки их количества.

На 3 этапе необходимо обеспечить развитие нормальной корневой системы, для чего обычно меняют основной состав среды (1/2 солей МС или среда Уайга), уменьшают количество сахара до 0,5-1,0 %, исключают цитокинины и увеличивают концентрацию ауксина до 1—2 мг/л. В некоторых случаях корнеобразование стимулируется добавлением к среде хлорогеновой или феруловой кислот (1-2 мг/л). Можно также обработать базальную часть побегов, извлеченных из пробирок, ауксинами (30-50 мг/л в течение 3-6 ч) и укоренять их без фитогормонов в агаризованной среде или другом субстрате; это дает больший процент укоренения, чем постоянное присутствие в среде ауксинов. Длительное время размножения на среде с цитокининами приводит к плохому укоренению. На данном этапе растения можно поместить на депонирование при пониженных температурах, что позволяет задерживать их развитие и таким образом сохранять длительное время, используя по мере надобности.

На 4 этапе проводят закалку растений, повышают их устойчивость к патогенным микроорганизмам и неблагоприятным факторам внешней среды, при этом увеличивают влажность воздуха, освещенность до 8-10 клк, подбирают оптимальный субстрат. Следует учитывать влияние фотопериода, спектрального состава света, температуры и газового состава атмосферы.

Давайте вместе сделаем данный сайт лучше! Поделитесь ссылкой на этот сайт со своими одногрупниками. Это поможет развитию нашего сайта.

2015-2020 © Биология для студентов | При использовании материалов сайта - прямая ссылка на vseobiology.ru обязательна.

^ Наверх