При выборе размера меристемного экспланта нужно стремиться получить максимальное число растений при максимальном проценте безвирусных.
Одни фитобиотехнологи предпочитают использовать предельно малый размер экспланта (0,075-0,100 мм) и разрабатывают оптимальные условия для получения нормального пробирочного растения.
Другие сочетают термотерапию и культуру меристем (предварительная термотерапия позволяет оздоровлять от вирусов при использовании меристемных эксплантов размером 0,3-0,8 мм). Однако термотерапия иногда приводит к отставанию в росте и деформации органов меристемных растений. При этом могут также усиливаться латентные вирусные инфекции.
Третий способ - культивирование меристем в сочетании с химиотерапией. В питательную среду вносят, например, аналог гуанозина «вирозол» (синте- тичсский рибавирин) в концентрации 40-200 ммоль, что увеличивает количество безвирусных меристемных растений до 80-100 % при 0-41 % в контроле.
Уязвимое место технологии оздоровления посадочного материала от вирусов - недостаток высокоспецифичных и высокочувствительных диагностикумов на вирусные инфекции. Используются:
- иммуноферментная техника,
- применение моноклональных антител,
- метод молекулярной гибридизации меченых фрагментов РНК и ДНК вирусов с вирусами тестируемого объекта и т.д.
Все это приводит к значительному возрастанию стоимости оздоровленного растения.
Полученные оздоровленные растения далее размножают обычным методом КМР. Исключение составляет техника микропрививок, которую применяют для оздоровления цитрусовых растений, персиков, иногда яблонь. Для цитрусовых необходимость такой техники связана со слабой эффективностью использования меристем малого размера. Получены успешные результаты при прививке меристемы лимонов и апельсинов размером 0,14-0,18 мм на пробирочные подвои, полученные из семян. При этом из семи вирусов цитрусов оздоровление составило: для 5 вирусов - 100 % привитых растений, для 2 вирусов - 80-98 %.